ELISA pomeni encimsko vezan imunski test in je tehnika, ki uporablja protitelesa in antigene. Kompleti ELISA, ki se običajno uporabljajo za ugotavljanje prisotnosti nalezljivih bolezni, zahtevajo, da se vzorec, kot je kri, pomeša s komercialno dostopnim testom. Vsak test je specifičen za določen organizem in komplet daje pozitivno ali negativno reakcijo, s čimer se diagnosticira okužba s to določeno boleznijo.
Človeški imunski sistem uporablja molekule, imenovane protitelesa, za prepoznavanje tujih vsiljivcev ali delov tujih vsiljivcev, imenovanih antigeni. Takoj, ko imunski sistem opazi prisotnost antigena, ustvari več molekul protiteles, ki specifično prepoznajo antigen. Ta protitelesa se vežejo na antigen in ga označijo za uničenje s strani preostalega imunskega sistema.
Če je oseba izpostavljena določenemu organizmu, razvije protitelesa za ta organizem. Ta protitelesa se lahko gibljejo v krvnem obtoku vse življenje kot zaščitni ukrep pred prihodnjo okužbo. Ljudje, ki imajo obstoječe nalezljive bolezni, bodo imeli v krvi tudi protitelesa proti tej bolezni. Protitelesa in antigeni so ponavadi izjemno specifični, čeprav lahko včasih protitelo prepozna tudi druge antigene, ki so tesno povezani s prvotno označenim antigenom.
Ta način prepoznavanja antigena s strani imunskega sistema se lahko kopira v komercialne komplete ELISA. Če komplet vsebuje protitelo ali antigen, se vzorec, ki vsebuje ciljno ali ciljno molekulo, veže na snov v kompletu. Vezava nasprotnih molekul običajno kaže na prisotnost iskanega specifičnega organizma, vendar te vezave ni mogoče zlahka videti.
Da bi ustvarili situacijo, v kateri je mogoče izmeriti vezavo protitelesa na antigen, je treba v komplete ELISA dodati več snovi. Običajno je to barvni marker, ki spremeni barvo le v določenih okoliščinah. Analitik lahko prebere dokončane komplete ELISA in po barvi vzorcev določi prisotnost ali odsotnost antigena ali protitelesa.
Proizvajalci izdelajo plastično ploščo z vdolbinicami kot osnovo za vsak komplet ELISA. Med proizvodnim procesom je notranjost vsake vdolbinice prevlečena z antigenom določenega organizma, kot je protein iz virusa hepatitisa B. Poleg plošče z vdolbino vsebuje komplet še dve snovi.
Ena je snov, ki je sestavljena iz encima, vezanega na protitelo. To dodatno protitelo se posebej drži protitelesa, za katerega je komplet namenjen zaznavanju. Torej, med pozitivnim testnim ciklom se antigen v vdolbinicah drži prepoznanega protitelesa bolezni v vzorcu, snov encim-protitelo pa se drži drugega konca protitelesa v vzorcu.
Kot zadnji korak v tehniki analitik spere vse, kar ni vezano na vdolbino, pri čemer ostanejo le vezane molekule. Če kompleks encim-protitelo ni našel protitelesa, na katerega bi se lahko oprijel, se izpere z drugimi ohlapnimi molekulami. Nato v vdolbinice doda substrat. Encim, vezan na protitelo, deluje na kemikalije v substratih, jih razgradi in ustvari substrat drugačne barve. To spremembo barve lahko stroj prebere kot pozitiven ali negativen test za patogen.