Western blot je tehnika laboratorijske analize, ki se uporablja za izolacijo beljakovin. Uporablja se lahko pri diagnostiki določenih bolezni, pa tudi pri raziskavah različnih beljakovin in procesov. Znano je, da je Western blot povezan z diagnozo okužbe s HIV, vendar se lahko uporablja tudi za iskanje sledi govejega spongiformnega encefalitisa (BSE) in lajmske bolezni. Vzorci, poslani na testiranje s protokolom Western blot, lahko vrnejo rezultate v nekaj dneh do nekaj tednih, odvisno od zmogljivosti laboratorija in nujnosti.
Pri Western blotu vzorec, ki je lahko iz krvi ali tkiva, najprej damo skozi elektroforezo, tako da se beljakovine ločijo po dolžini. Trak gela za elektroforezo z izoliranimi beljakovinami ciljne dolžine lahko uporabimo za prenos beljakovin na nitrocelulozni substrat za naslednjo stopnjo testa. V tej fazi se v vzorec vnese protitelo z namenom označevanja beljakovin z antigeni, na katere se to protitelo zaklene.
Ko so beljakovine označene, jih je mogoče zlahka identificirati. V primeru testiranja na bolezen prisotnost reaktivnega proteina kaže, da je bil vzorec pozitiven. Western blots redko vrne lažno pozitivne rezultate, čeprav se lahko zgodi občasno, lahko pa vrnejo tudi lažno negativne rezultate, pri katerih ima oseba dejansko bolezen, vendar se to ne pokaže pri western blot testiranju. To je lahko še posebej pogosto v primerih, ko se povzročitelj bolezni še ni začel razmnoževati.
Raziskovalci lahko uporabijo rezultate za identifikacijo specifičnih beljakovin, ki jim sledijo, in za številne druge namene. Razumevanje delovanja western blot protokola je pomembna veščina za nekatere raziskovalce in laboratorijske tehnike, saj morajo biti sposobni vrniti zanesljive in zanesljive rezultate s to metodo. Laboratorijske veščine, vključno z učenjem, kako ravnati s zapletenimi ali slabimi vzorci in kako se izogniti kontaminaciji med postopkom, tako da je znano, da so rezultati testa resnični.
Ta tehnika je včasih znana kot imunoblot, ker so v bistvu želene beljakovine “popišane” s protitelesi, tako da se pokažejo. Ta test se lahko uporablja za iskanje beljakovin pri vseh živalih, ne samo pri ljudeh, pri čemer veterinarji pogosto uporabljajo test Western blot, da ugotovijo, ali je bila čreda krav okužena ali izpostavljena BSE.