Postopek ELISA je postopek, ki se uporablja za izvedbo encimsko povezanega imunosorbentnega niza (ELISA), testa, ki se lahko uporablja za ugotavljanje prisotnosti specifičnih beljakovin in določanje njihovih koncentracij. Dejansko obstaja več različnih postopkov, ki jih je mogoče uporabiti za test ELISA, vključno z neposrednimi, posrednimi in tako imenovanimi “sendvič” postopki. V vseh primerih se postopek ELISA izvaja v laboratoriju pod nadzorovanimi pogoji, da se zmanjša tveganje za lažne rezultate.
Za izvedbo testa ELISA je potreben vzorec, kot je kri. Pogost razlog za izvedbo ELISA je testiranje na izpostavljenost povzročitelju okužbe, v tem primeru lahko zadevni vzorec vsebuje določeno beljakovino ali pa ne, in test se izvede za iskanje te beljakovine. Test se lahko uporablja tudi za preverjanje koncentracije beljakovin.
Za izvedbo testa se pogosto uporablja naprava, imenovana mikrotiterska plošča. Ljubitelji medicinskih in kriminalnih dram verjetno poznajo mikrotitrske plošče; izgledajo kot majhni pladnji s številnimi vložki, od katerih vsak drži vialo. V postopku sendvič ELISA tehnik začne tako, da viale obloži z znanim antigenom v znani koncentraciji in jih nato spere s pufrsko raztopino. Nato dodamo serum, narejen iz vzorca pacienta, izpranega v isti pufrski raztopini.
Če ima bolnik protitelesa proti antigenom že v epruvetah, se bodo ta prilepila na stranice epruvete. Naslednji korak v postopku ELISA vključuje uvedbo istega antigena, označenega z encimom, v epruvete. Antigen se zaklene proti protitelesom, ki so se zataknila na straneh epruvet. Encim fluorescira ali spremeni barvo, kar omogoča tehniku, da vidi, da ima serum protitelesa, ki so se zaklenila na antigene, in določi koncentracijo na podlagi intenzivnosti encimske reakcije.
Postopek ELISA je zelo občutljiv in izjemno natančen, pri čemer tehniki uporabljajo zelo specifične antigene, da zagotovijo, da prepoznajo prava protitelesa, ali obratno, odvisno od tega, kakšen test se izvaja. Vendar pa se zgodijo lažno pozitivni rezultati. V primeru lažno pozitivnega se test ELISA običajno uporablja za preverjanje znakov izpostavljenosti virusu HIV, včasih pa je lažno pozitiven, ker se raztopina lahko veže na beljakovino, povezano s HIV, ki jo imajo nekateri ljudje, ne da bi bili okuženi. Zato je treba pozitivo potrditi z Western Blotom.