Kaj je masni spektrometer s tekočo kromatografijo?

Masni spektrometer s tekočo kromatografijo (LC-MS) je naprava, ki se uporablja v analitski kemiji za določanje vsebnosti vzorčne snovi. To naredi s kombinacijo dveh različnih tehnik: tekočinske kromatografije in masne spektrometrije. Prva od teh tehnik, tekoča kromatografija, se uporablja za ločitev vzorca na njegove kemične sestavine. Masna spektrometrija se nato uporablja za zbiranje informacij o masi vsake komponente. Masni spektrometer s tekočo kromatografijo lahko daje zelo občutljive odčitke in se uporablja na številnih različnih področjih, vključno s farmacevtskimi raziskavami in forenzično toksikologijo.

Tekočina kromatografija je prva tehnika, ki jo uporablja masni spektrometer s tekočo kromatografijo. Raztopino vzorca, ki je v tekoči fazi, odcedimo skozi kolono, ki vsebuje nepremično fazo, na primer porozno trdno snov. Ker različne vrste delcev v raztopini vzorca prehajajo skozi stacionarno fazo z različnimi hitrostmi, se ločijo v pasove.

Ločitev v stolpcu se lahko pojavi na več načinov. Če so molekule ene snovi večje od molekul druge, traja dlje, da odtečejo skozi porozni material in se zato ločijo od manjših molekul, ki se hitreje premikajo. Kemični dejavniki lahko vplivajo tudi na hitrost pretoka. Na primer, polarne molekule – tiste, ki imajo delni električni naboj – lahko pritegne naboj stacionarne faze in postanejo “lepljive” in manj hitro tečejo skozi kolono.

Masni spektrometer s tekočo kromatografijo prepusti vsak pas ločenega materiala skozi ultravijolično svetlobo in zazna njegovo absorbanco. Z drugimi besedami, beleži, koliko svetlobe in katere valovne dolžine svetlobe absorbira snov. Te informacije se pogosto lahko uporabijo za identifikacijo snovi. V primerih, ko je potrebnih več podatkov, je mogoče delce nadalje analizirati z delom naprave z masnim spektrometrom.

Delci, ki so bili ločeni po vrsti v fazi tekočinske kromatografije, se ločijo po masi v fazi masne spektrometrije. Prvič, delci se ionizirajo ali napolnijo z odstranitvijo elektronov, kar jim daje pozitiven skupni naboj. Magnetno polje se nato uporabi za “upogibanje” poti nabitega delca, ko ta prehaja skozi napravo. Delci z večjo maso se ne premikajo tako enostavno kot lažji, manjši delci, zato se ne odklonijo tako daleč. Masni spektrometer električno beleži količino vsake vrste delcev, ki uspešno dosežejo detektor.

Prednost masnega spektrometra s tekočinsko kromatografijo je, da lahko z veliko občutljivostjo zabeleži vrsto in maso vsake kemične komponente vzorca. Pogosto se uporablja za analizo kompleksnih organskih vzorcev v farmakoloških raziskavah in v proteomiki, preučevanju beljakovin. Masni spektrometer s tekočo kromatografijo je bil celo izboljšan za uporabo v forenzični toksikologiji, za analizo in identifikacijo vzorcev, ki bi bili sicer preveč krhki za preučevanje.