Umerjanje spektrofotometra je postopek, pri katerem se znanstveni instrument, znan kot spektrofotometer, kalibrira, da se potrdi, da pravilno deluje. To je pomembno, saj zagotavlja, da so meritve, pridobljene z instrumentom, točne. Postopek se pri različnih instrumentih nekoliko razlikuje, pri čemer večina proizvajalcev zagotavlja podroben vodnik za umerjanje v uporabniškem priročniku, tako da ljudje vedo, kako pravilno kalibrirati opremo. Ko se ta postopek izvede, mora oseba, ki to izvaja, zabeležiti v dnevnik, ki je priložen opremi, in v svoje eksperimentalne zapiske, tako da ljudje vedo, kdaj je bila naprava nazadnje kalibrirana in z njo ravnala ter kdo.
Spektrofotometer je sposoben tako oddajati kot sprejemati svetlobo. Naprava se uporablja za analizo vzorcev testnega materiala s prehajanjem svetlobe skozi vzorec in odčitavanjem intenzitete valovnih dolžin. Različni vzorci vplivajo na svetlobo na različne načine, kar raziskovalcu ali tehniku omogoča, da izve več o materialih v testnem vzorcu tako, da vidi, kako se svetloba obnaša, ko prehaja skozi vzorec. Za potrditev točnosti rezultatov je potrebna kalibracija spektrofotometra.
Pri kalibraciji spektrofotometra se referenčna raztopina uporablja za izničenje opreme. Ta rešitev zagotavlja osnovno ali ničelno odčitavanje. Naprava se kalibrira tako, da se referenčna raztopina postavi v spektrofotometer, se nastavitve izničijo in zažene instrument. Nato lahko vzorce dejanskega preskusnega materiala izpostavimo spektrofotometriji z zaupanjem, da je bil stroj kalibriran in pravilno deluje.
V spektrofotometru z enim žarkom se ustvari en žarek svetlobe, zato je treba napravo ponovno kalibrirati za vsako uporabo. V spektrofotometru z dvojnim žarkom se lahko žarki istočasno pošljejo skozi preskusni vzorec in referenčni vzorec, da ustvarijo dva niza rezultatov, ki se lahko uporabita za referenco in kalibracijo. V obeh primerih lahko kalibracijo spektrofotometra v laboratoriju opravi nekdo, ki dela s strojem. Če se pri stroju pojavijo resne težave, ga lahko pošljete proizvajalcu v vzdrževanje, popravilo in morebitno zamenjavo.
Za pravilno delovanje spektrofotometra ga je treba pred uporabo pustiti, da se segreje. Številne naprave se segrejejo približno 10 minut. Pomembno je, da se izognete izvajanju kalibracije spektrofotometra med fazo segrevanja, saj bo to izničilo nastavitve. Prav tako se je treba zavedati, da so za določene vrste valovnih dolžin morda potrebni posebni filtri in nastavki za delovanje naprave.