Mikrotonalna glasba je vrsta harmonije ali organizacije glasbenih zvokov, ki uporablja intervale, manjše od tistih, ki se običajno predvajajo v zahodni glasbi. Zahodnjaški glasbeni ključi ali vzorci not so razdeljeni na polovične in cele korake. Polovični korak je najmanjši interval, ki ga priznava zahodna glasba. V mikrotonalni glasbi se uporabljajo intervali, manjši od pol koraka.
V zahodnem slogu je v oktavi 12 pol korakov. Lestvice so sestavljene iz kombinacij polovičnih in celih korakov. Mikrotonalna glasba ima veliko širši nabor glasbenih vzorcev, saj se uporabljajo manjši intervali, število intervalov na vzorec pa ni standardizirano. Različni glasbeniki in skladatelji uporabljajo svoje lastne delitve, včasih pa oktavo delijo na 19 ali 31 enakih korakov. V drugih primerih oktava sploh ni osnova za glasbeni vzorec.
Nezahodne kulture včasih uporabljajo mikrotone v svoji glasbi. Za dosego zvoka lahko uporabljajo instrumente ali človeški glas. Včasih si skladatelji izumijo lastne inštrumente ali prilagodijo obstoječe inštrumente za igranje mikrotonov.
Vsi instrumenti niso zasnovani za predvajanje mikrotonalne glasbe. Zahodni inštrumenti običajno niso, vendar je nekatere mogoče prilagoditi za ta namen. Čeprav je mogoče pihalcem in trobilom prilagoditi višino svojih inštrumentov v mikrotonih z uporabo zraka in ust ter prstov, je težko doseči natančnost. Izjema pri tem je pozavna, ki uporablja drsnik za spreminjanje dolžine cevi za spreminjanje višine zvoka. Trobente, tube in roga ni bilo mogoče prilagoditi tako enostavno.
Na mikrotonalno glasbo so sposobna tudi godalna glasbila, ki niso obremenjena, za tovrstno glasbo pa se pogosto uporabljajo pokončni bas, violina, viola, violončelo in mnoga druga struna. V nekaterih primerih je glasbeniku z velikimi prsti težko doseči pravilen položaj na inštrumentu, saj so mikrotoni na vratu inštrumenta izjemno blizu drug drugemu.
Pihala, kot so klarinet, flavta in saksofon, niso izdelana za igranje mikrotonov. Pihalo ima luknje v intervalih vzdolž lesene ali kovinske cevi. Luknje so zaprte za prilagoditev naklona. Čeprav bo pokrivanje polovice luknje spremenilo višino tona za manj kot polovico koraka, mehanizem na pihalih preprečuje uporabo te metode.
Tudi če lahko instrument igra mikrotone, je za izvajanje glasbe še vedno potreben dobro usposobljen glasbenik. Mikrontonalna glasba zahteva zelo prefinjen sluh za razlikovanje med toni. Glasbeniku, ki je bil usposobljen za igranje glasbe v vzorcu dvanajstih oktav, bi se težko naučil igrati mikrotonalno glasbo, ker njegovo uho ne bi bilo vajeno uglasitve.