Kaj je obarvanje protiteles?

Barvanje protiteles je laboratorijski postopek, ki se uporablja za obarvanje vzorca za odkrivanje prisotnosti določenih antigenov v vzorcu ali za poudarjanje antigenov, tako da jih je mogoče jasno videti. Obstaja več različnih postopkov obarvanja protiteles, ki jih je mogoče uporabiti, odvisno od vzorca in preferenc tehnika. To tehniko poučujejo na visokošolski in univerzitetni ravni v mnogih regijah, v srednjih šolah z naprednimi znanstvenimi programi pa se lahko študentje naučijo tudi obarvanja protiteles.

Pri barvanju s protitelesi se protitelo vnese v vzorec, kot je strganje ali biopsija. Če so v vzorcu antigeni, na katere se bo protitelo odzvalo, se nanje zaklene. Ko se vzorec spere, se odvečna protitelesa izperejo, za seboj pa ostanejo protitelesa, ki so se zaklenila na vzorec. Če raziskovalec uporablja konjugirana protitelesa s pritrjenimi fluorescentnimi oznakami, bo vzorec zasvetil pod ustrezno osvetlitvijo, kar izdaja prisotnost zadevnih protiteles.

V drugih primerih morajo ljudje uporabiti sekundarna protitelesa. Po izpiranju vzorca dodajo sekundarno protitelo, pripravek s pritrjeno fluorescentno oznako. Sekundarna protitelesa se pritrdijo na primarna protitelesa v vzorcu in bodo fluorescirala pod svetlobo, kot je opisano zgoraj. Fluorescenca se lahko uporablja pri diagnostiki bolezni, pri čemer laboratorijski tehniki preverjajo vzorce za antigene, povezane s specifičnimi boleznimi, lahko pa jo uporabimo tudi za iskanje znakov kontaminacije in ugotavljanje prisotnosti antigenov iz drugih razlogov.

Pri mikroskopiji je lahko barvanje s protitelesi včasih koristno za poudarjanje določenih struktur. Tudi z odlično ločljivostjo je mikroskopija včasih težko vidna in lahko je težko izbrati skrite ali majhne strukture na sliki. Uporaba obarvanja s protitelesi omogoča ljudem, da ustvarijo zastavo za enostavno prepoznavanje in oris zanimivih struktur, kot so določene vrste tkiva ali strukture znotraj celic. Fluorescenca bo vidna na vseh mestih na stekelcu, kjer je prisotno protitelo, ki nas zanima, kar prikazuje strukture v vzorcu.

Barvanje s protitelesi zahteva dostop do laboratorijske opreme, protiteles in različnih raztopin, ki se uporabljajo med postopkom fiksiranja in konzerviranja vzorcev. Pomembno je, da postopek izvedete pravilno, da se izognete kontaminaciji in napakam, kot je dovoljenje, da raztopine ostanejo predolgo na vzorcu, prikrivajo ali zamenjujejo rezultate. Številni laboratoriji imajo priročnik, ki mu sledijo njihovi uslužbenci, in ko pripravljajo gradivo za raziskave, bodo ljudje podrobno opisali svoje metode, da se njihovo delo lahko ponovi.